Basic principle of Radio-pharmaceuticals Labeling Efficiency Test (TLC)

السلام عليكم نكمل كلامنا عن ال99mTC-MIBI  وطريقه اختبار الlabeling efficiency طيب دلوقتى بعد ماعملت الlabeling اصبح عندى ثلاثه اشياء  هما ايه :-

1-free 99mTC

2-Labeled 99mTC-MIBI

3-Hydrolyzed reduced 99m TC

اذاى افرق بينهم ؟؟؟؟؟

المفروض انا عايز اعرف نسبه ال99mTc-MIBI  وده هاعرفه بال thin Layer Chromatography TLCزteps:-

e .

Chromatography Chromotography TLC

 :-

طريقه تستخدم لفصل اى mixture  او solution  وبتساعدنا فى تحديد كميه الdesired components وكميه الimpurities  .

تعتمد هذه الطريقه على ان كل component له

  Characteristic distance can be traveled with specific solvent  

النسبه بين المسافه اللى بيتحركها الcomponent  مع الsolvent (mobile phase)  والمسافه اللى بيتحركها الsolvent  لوحده تسمى     Rf (relative front) ودى بتكون specific لكل component of mixture يعنى مثلا هاتلاقى الfree 99mTC له Rf  معينه مع solvent معين والhydrolyzed reduced 99mTcكمان له Rf مختلفه وبالنسيه للLabeled 99mTC-MIBI  له كمان Rf .

 

 

اذا اقدراستخدم الTechnique  ده فى عمليه الفصل بين مكونات الmixture  واقدر احدد نسبه كل مكون من المكونات عن طريق انى هاكون عارف قيمه ال Rf بتاعته.

 طيب انا لازم اعرف هاستخدم ايsolvent (mobile phase) وكمان ايه نوع ال'paper (stationary phase)  اللى هاستخدمها لان مع اختلاف كلا من الmobile and stationary phase  هاتختلف قيمه الRf .

ركز فى الجدول اللى جاى ده :-

ده مثال يوضح قيم ال Rf واختلافها مع الsolvent type  لكل component  

هتجد رقم 0 or 1  الصفر يعنى ان ال component ده ماتحركش واقف عند الorigin  والواحد يعنى ان الcomponent اتحرك لمسافه تساوى المسافه اللى اتحركها الsolvent لوحده اذا انا ممكن باستخدام الsaline افصل ال hydrolyzed 99mTc عن ال free and labeled وهلاقى الhydrolyzed at origin  لان الRf =0 لاكن ال free and labeled هايكون اخر الpaper  بتسمى الSolvent front لان Rf=1 .

لو انا قطعت الورقه نصين بالتالى هاقدر احسب الcounts فى الorigin and solvent front ممكن باستخدام الdose calibrator or using gamma camera

ونفس الطريقه مع الAcetone بس هنا هاقدر اطلع نسبه الfreeاللى اتفصل عن الhydrolyzed and labeled .

اذا انا عندى نسبه الfree ونسبه الhydrolyzed  واقدر اطرحها من 100%  عشان احصل على نسبه ال /Labled 99mTC-MIBI

 

دى كانت الفكره العامه وهاتلاقى كل kit انت بتستخدمها ليها طريقه فى اختبار كفائة التحضير وهايكون فى جدول موضح بيه Rf values وانواع الsolvent وبالتالى هاتقدر تعرف كل component هايتحرك مسافه اد ايه

.Steps:-Different Methods according to according to mobile and stationary phases

1.      a microliter sample of the radiopharmaceutical is applied to the strip at the origin.

2.      The chromatography strip is then placed into asuitable solvent in a chromatography chamber (vials or test tubes).

3.      After permitting the solvent front (SF) to migrate up the strip to the desired distance, the strip is retrieved from the chromatography chamber and allowed to dry.

4.      Once the Rf values are known, the strips are cut according to these values in order to determine the number of counts in each region representing specific radiochemical complex or complexes.

5.      These sections of the strip are then counted individually using the appropriate instrumentation. Alternatively, intact strips can be scanned with a radiochromatogram scanner.

6.      After determination of the number of counts, calculations can be performed to

determine the percentage bound and the percentage of radiochemical impurities.

ملحوظه :- دايما خلى مستوى سطح  الsolvent  اقل من خط الorigin  وعلم الorigin بالقلم الرصاص  والمفروض الlabeling efficiency >95%